Bioendo™ rCR 엔도톡신 시험 키트
Recombinant Cascade Reagents Chromogenic Assay
유전자 재조합으로 발현한 인자 C · 인자 B · 프로효소 3종이 엔도톡신에 의해 순차 활성화되어 비색 기질에서 노란색 발색단(pNA)을 생성하는 재조합 캐스케이드 발색 방식입니다. 기존 속도론적 비색법 리더(405 nm)를 그대로 사용할 수 있고, 최고 0.001 EU/mL까지 검출 가능한 최신 세대 재조합 시약입니다.
제품 상세 정보
재조합 캐스케이드(rCR) 방식 개요
전통 LAL 시약의 인자 C → 인자 B → 프로효소 3단계 캐스케이드 반응을 3종 모두 유전자 재조합으로 발현합니다.
엔도톡신이 재조합 인자 C를 활성화 → 활성 인자 C가 인자 B를 활성화 → 활성 인자 B가 프로효소를 활성화 → 활성 효소가 비색 기질을 절단하여 노란색 pNA(파라-니트로아닐린) 방출. 405 nm에서 흡광 측정으로 엔도톡신 정량이 가능합니다.
rCR 주요 강점 (BIOENDO 원문)
- 편리한 검출 — 속도론적 비색법(KC)과 동일한 405 nm 흡광 리더 사용 · 장비 교체 불필요
- 고감도 — 최대 0.001 EU/mL까지 검출 가능
- 안정성 — 재조합 발현으로 로트 간 재현성 우수
- 특이성 — β-glucan(진균 다당류)에 반응하지 않음 → 위양성 방지 (Factor G 우회 방지)
- 동물 유래 원료 미사용 — 투구게 자원 보호
RCR0428S 시약 구성 (BIOENDO 실측)
| 시약 | 수량 | 비고 |
|---|---|---|
| Recombinant Cascade Reagents | 4 vials × 2.8 mL | rC + rB + 프로효소 3종 통합 |
| Reconstitution Buffer | 4 vials × 3.0 mL | 재구성 완충액 |
| Control Standard Endotoxin (CSE10V) | 2 vials | 표준곡선 작성 |
| Water for BET | 2 vials × 50 mL | 희석용 |
필요 장비: 속도론적 비색법 마이크로플레이트 리더 (405 nm · 37°C 항온 · Kinetic 지원)
KC0828 · MKC · EC64405 사용자는 동일 장비로 rCR 전환 가능합니다.
rCR 2종 라인업 (BIOENDO 실측)
| 코드 | 구성 | 감도 |
|---|---|---|
| RCR0428S | 4 vials × 2.8 mL · 완전 구성 | 0.001 – 10 EU/mL (초저감도) |
| RCR0428 | 동일 구성 | 0.005 – 5 EU/mL (표준) |
선택 가이드
- 초저감도 요구 (WFI · 안과제제 · 세포치료 원자재) → RCR0428S
- 표준 QC (제약 · 바이오시밀러 완제품) → RCR0428
rFC vs rCR 비교 (재조합 시약 선택 가이드)
| 항목 | rFC (Recombinant Factor C) | rCR (Recombinant Cascade) |
|---|---|---|
| 재조합 성분 | 인자 C만 (1종) | 인자 C + B + 프로효소 (3종) |
| 측정 방식 | 형광 (380/440 nm) | 비색 (405 nm) |
| 필요 장비 | 형광 리더 (별도) | 기존 흡광 리더 그대로 |
| 최고 감도 | 0.005 EU/mL | 0.001 EU/mL |
| β-glucan 특이성 | 있음 | 있음 |
| 투구게 자원 보호 | ✓ | ✓ |
| USP <86> · EP 2.6.32 | ✓ | ✓ |
결론
속도론적 비색법(KC) 사용 고객이 재조합 시약으로 전환한다면 rCR이 최적입니다. 기존 405 nm 흡광 리더를 그대로 사용할 수 있고, 최고 감도(0.001 EU/mL)도 rFC보다 높습니다.
형광 리더가 이미 있는 고객이라면 rFC도 좋은 선택입니다.
시험 표준 절차
- 사전 준비: 시약 실온 평형화 · 마이크로플레이트 리더 37°C incubation ON · 30분 안정화.
- 표준곡선: CSE를 LAL 시약수(LRW)로 단계 희석 (0.001 · 0.01 · 0.1 · 1 · 10 EU/mL 5점).
- rCR 재구성: rCR vial에 Reconstitution Buffer를 지정 부피로 넣고 부드럽게 혼합.
- 플레이트 분주: 96-well plate에 표준·검체 각 100 μL, rCR 100 μL 순차 분주.
- Kinetic Read: 405 nm, 30초 간격, 총 60 – 90 분. Shaking은 각 read 직전 5초.
- 분석: onset time (임계값 도달 시간) 산출 → log(EU/mL) 직선 회귀 → 검체 EU/mL 정량.
- 합격 판정: 상관계수 |r| ≥ 0.980, PPC 회수율 50 – 200%.
기존 KC0828 프로토콜과 대부분 동일 · 전환 부담 최소 — 전환 가이드 요청 →
CoA · MSDS · 시험방법서
BIOENDO CoA · MSDS · 시험방법서를 로트 단위로 제공합니다. USP <86> 대체 검사 밸리데이션 지원 자료도 별도 제공 가능합니다.
- Certificate of Analysis (로트별 실측 감도)
- Material Safety Data Sheet
- Instruction for Use
- KC → rCR 전환 밸리데이션 가이드 (별도 요청)
📥 문서 요청 →
rCR 시약 견적 · 평가용 요청
기존 KC · MKC 사용자는 동일 장비로 rCR 전환 가능. 밸리데이션 가이드와 함께 평가용 시약을 무료로 보내드립니다.