Bioendo™ EC64405 엔도톡신 시험 키트
EC Endotoxin Test Kit (End-Point Chromogenic Assay)
LAL 시약과 별도의 비색 기질(Chromogenic Substrate)을 사용하여 반응 종료 시점(single time-point)에서 405 nm 흡광을 측정하는 방식입니다. 기존 Pierce · Thermo 종말점 비색법 사용 고객이 동일 프로토콜 · 동일 장비 그대로 전환할 수 있는 대체 옵션입니다. 착색 시료용 Diazo Coupling(EC80545)도 별도 제공합니다.
제품 상세 정보
종말점 비색법 (End-Point Chromogenic) 방식 개요
엔도톡신이 LAL 시약을 활성화시키면 인자 C · B · 프로효소가 순차 활성화되어 발색 기질(Chromogenic Substrate)로부터 노란색 발색단(p-니트로아닐린, pNA)이 생성됩니다. 지정된 반응 시간 후(예: 15분) 반응을 정지시키고 405 nm 흡광을 측정하여 정량합니다.
속도론적 비색법(KC) 대비 강점
- 기존 Pierce · Thermo 사용 고객 동일 프로토콜 전환 가능
- 단순 반응 · 결과 판독 (Kinetic Read 필요 없음)
- 고정 시점 측정으로 여러 시료 병렬 처리 용이
KC 대비 한계
- 검출 범위 좁음 (0.1 – 1 EU/mL · KC는 4 로그)
- 시료 간섭 조기 감지 어려움 (단일 시점 측정)
- 초저감도 요구 시 KC 또는 S 감도 옵션 권장
EC64405 시약 구성 (BIOENDO 실측 · 64 tests)
| 시약 | 수량 | 비고 |
|---|---|---|
| Lyophilized Amebocyte Lysate | 2 vials × 1.7 mL | LAL 시약 |
| Water for BET | 2 vials × 50 mL | 재구성·희석용 |
| Control Standard Endotoxin (CSE) | 2 vials | 표준곡선 작성 |
| Chromogenic Substrate | 4 vials × 1.7 mL | 비색 기질 (LAL과 별도 성분) |
계산: 총 64 tests / kit
필요 장비: 405 nm 흡광 마이크로플레이트 리더 (SpectraMax · ELx808 · K LAB MRX 등)
EC80545 (Diazo Coupling · 착색 시료용)
Diazo Coupling 반응을 통해 pNA를 진한 자색(Azo 색소)으로 전환합니다. 시료 자체가 착색되어 있는 경우 (약물 · 완충액 · 혈장 · 색소 함유) 표준 종말점 비색법(EC64405)은 간섭이 발생하지만, Diazo Coupling은 반응 파장이 다르므로 간섭 극복 가능합니다.
EC80545 시약 구성 (80 tests)
| 시약 | 수량 |
|---|---|
| Lyophilized Amebocyte Lysate | 5 vials × 1.7 mL |
| Water for BET | 4 vials × 50 mL |
| Control Standard Endotoxin (CSE) | 5 vials |
| Chromogenic Substrate | 5 vials × 1.7 mL |
| Diazo Reagent 1 | 5 vials × 10 mL |
| Diazo Reagent 2 | 5 vials × 10 mL |
| Diazo Reagent 3 | 5 vials × 10 mL |
선택 가이드
- 투명 시료 · 표준 QC → EC64405 (구성 간단 · 저비용)
- 착색 시료 (약물 · 혈장 · 색소) → EC80545 (Diazo Coupling으로 착색 간섭 제거)
EC 4종 완전 라인업 (BIOENDO 실측)
| 코드 | 총 테스트 | 방식 | 감도 |
|---|---|---|---|
| EC64405 | 64 tests | 표준 종말점 비색법 | 0.1 – 1 EU/mL |
| EC64405S | 64 tests | 표준 (감도 향상) | 0.01 – 0.1; 0.1 – 1 EU/mL |
| EC80545 | 80 tests | Diazo Coupling | 0.1 – 1 EU/mL |
| EC80545S | 80 tests | Diazo Coupling (감도 향상) | 0.01 – 0.1; 0.1 – 1 EU/mL |
시험 표준 절차 (EC64405 기준)
- 사전 준비: 시약 실온 평형화 · 마이크로플레이트 리더 37°C incubation ON · 30분 안정화.
- 표준곡선: CSE를 LAL 시약수(LRW)로 단계 희석 (0.1 · 0.25 · 0.5 · 1 EU/mL 4점).
- Lysate 재구성: LAL vial에 LRW를 지정 부피로 넣고 부드럽게 혼합.
- Chromogenic Substrate 재구성: 별도로 LRW에 재구성. (LAL과 혼합 X)
- 1차 반응: 96-well plate에 표준·검체 각 100 μL, LAL 100 μL 분주 → 37°C 10분 반응.
- Chromogenic Substrate 첨가: 100 μL 첨가 → 37°C 6분 반응.
- Stop 시약 첨가: Diazo 또는 지정 Stop 시약 → 405 nm 흡광 측정.
- 분석: 흡광값 → log(EU/mL) 직선 회귀 → 검체 EU/mL 정량. |r| ≥ 0.980, PPC 회수율 50 – 200%.
CoA · MSDS · 시험방법서
BIOENDO CoA · MSDS · 시험방법서를 로트 단위로 제공합니다. 견적 문의 시 로트 번호 또는 사용 목적을 알려주시면 최신 문서를 함께 발송해 드립니다.
- Certificate of Analysis (로트별 실측 감도 · pH · 잔류 성분)
- Material Safety Data Sheet
- Instruction for Use (Diazo Coupling 포함)
- Pierce · Thermo 사용자용 전환 가이드
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EC 시약 견적 · 평가용 요청
보유 마이크로플레이트 리더 모델과 시험 목적을 알려주시면, 사용 방법 안내와 함께 평가용 시약을 보내드립니다.